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第163期-司美格魯肽純化用填料和設(shè)備

2023年08月01日來源:管理員
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胰島素藥物發(fā)展歷程

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年代

胰島素種類

主要分離純化方法

胰島素純度

90年代末-至今

胰島素類似物

表達(dá)系統(tǒng)的改進

離子交換和制備型高效液相

>99%

80至90年代

重組人胰島素

離子交換和制備型高效液相色譜

99%

50至70年代

動物胰島素

常規(guī)層析法

離子交換和分子篩層析

約95%

20至40年代

動物胰島素

結(jié)晶和重結(jié)晶

約80%


司美格魯肽純化工藝舉例


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多肽的分離純化工藝舉例(2-3步)


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離子交換色譜分離材料

1. Toyopearl NH2-750F為一款耐鹽型的陰離子交換填料,主要官能團為伯胺基,同時也具有很弱的疏水模式作用,從而使其具有耐鹽性。

2. 一般而言,細(xì)胞液中都含有0.1-0.15molNaCl,使用普通的離子交換填料,必須經(jīng)過脫鹽的處理,但是針對NH2-750F這款填料,可以直接進行上樣無需脫鹽,大幅度節(jié)省操作的時間和成本。

3. 同時,這款填料孔徑較大,所以分離大分子的效果也非常明顯。

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反相色譜分離材料

1.高效液相反相色譜技術(shù)分辨率高。

2.精細(xì)純化單元:2-3步高效反相色譜精純步驟,降低離子交換不能去除的雜質(zhì)含量(如二聚體雜質(zhì)、A鏈8-9位殘基之間肽鍵斷裂雜質(zhì)、酰胺殘基的脫氨雜質(zhì)等)。

3.硅膠反相填料精純關(guān)鍵點:分離選擇性、載樣量和回收率、填料化學(xué)穩(wěn)定性(耐受強堿在線清洗,CIP)。

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測試條件條件:0.1M NaOH/EtOH=50/50

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H&EDICP)填料的堿性耐受性明顯優(yōu)于市場上穩(wěn)定性最好的Kromasil填料,具有優(yōu)異的化學(xué)穩(wěn)定性。

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應(yīng)用案例-多肽產(chǎn)品

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多肽純化設(shè)備的選型


1.?分子篩填料設(shè)備選型


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使用分子篩填料要求是填料裝填高度大于75cm,層析柱柱效要求高,上樣量比較低,只有填料體積的1%;目前多肽中應(yīng)用相對較少。

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2.?離子交換填料設(shè)備選型


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用于離子交換填料,疏水填料等,用于填料篩選和工藝開發(fā)及中試項目。


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用于離子交換填料,疏水填料等,用于手動層析柱,簡易層析系統(tǒng)或全自動層析系統(tǒng)。

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3.?反相填料和聚合物填料設(shè)備選型


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反相C18/C8,聚合物填料走制備液相和中高壓DAC設(shè)備,可以保證產(chǎn)品高柱效和產(chǎn)品分離度。


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C18中高壓層析系統(tǒng)和動態(tài)軸向壓縮柱產(chǎn)品,用于客戶的工業(yè)放大。


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廈門客戶?20201L防爆系統(tǒng)+DAC100;裝填填料是Cytiva SOURCE?30Q或東曹 Super Q-650MDEAE 5PW(20μm) 及國內(nèi)同類型產(chǎn)品。


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